孟加拉红培养基(虎红琼脂)
(Rose Bengal Agar)
用 途:
供霉菌和酵母的计数、分离和培养用(GB/T4789.28-2003中4.80和化妆品卫生规范)。
配方(每升):
蛋白胨 |
5g |
葡萄糖 |
10g |
磷酸二氢钾 |
1g |
硫酸镁 |
0.5g |
琼脂 |
15g |
孟加拉红 |
0.03g |
氯霉素 |
0.1g |
最终pH |
7.2±0.2 |
使用方法(计数用法):
1、称取本品31.6g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌20min。
2、无菌操作称取检样25克(或25mL),放入含有225mL灭菌水的玻璃三角瓶中,振摇30min,即为1:10稀释液,依次做1:100、1:1000……稀释。
3、根据对样品污染情况的估计,选择2-3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿。
4、将凉至45℃左右的培养基注入平皿中,待琼脂凝固后,倒置于25—28℃温箱中培养。
5、3d后开始观察结果,共培养观察5d。
6、计算方法:通常选择菌落数在10-150之间的平皿进行计数(如食品卫生国家标准),也有选用5-50个之间的平皿进行计数(化妆品卫生规范),同稀释度的2个平皿菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克(或每mL)检样中所含霉菌和酵母菌数。
质量控制:
本品倾注平皿后呈玫瑰红色,下列菌株接种后25—28℃培养72h生长情况如下表。
菌 名 |
菌 号 |
生长状况 |
菌落特征 |
黑曲霉 |
ATCC16404 |
良好 |
菌丝白色孢子黑色,底部玫瑰红色 |
白色念珠菌 |
ATCC10231 |
良好 |
菌落表面呈奶油色 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
被抑制 |
—— |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
被抑制 |
—— |
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格: 250g
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